Doug (Jack Black) en Griff (Paul Rudd) zijn al sinds hun kindertijd beste vrienden en hebben er altijd van gedroomd om een remake te maken van hun favoriete film aller tijden: de filmklassieker Anaconda. Wanneer een midlifecrisis hen ertoe aanzet om eindelijk de sprong te wagen, trekken ze diep het Amazonegebied in om te beginnen met filmen. Maar het wordt menens wanneer er een echte reuzenanaconda opduikt, waardoor hun komisch chaotische filmset verandert in een levensgevaarlijke situatie. De film die ze zo graag willen maken? Die zou wel eens hun dood kunnen betekenen...